jurkat細胞的冷凍保存方法

　　jurkat細胞冷凍保護體外培養物，除了必須有冷凍速率、合適的冷凍保護劑和凍存溫度外，在復蘇時也必須有合適的復溫速率，這樣才能保證獲得冷凍保存效果。復溫速率是指在細胞復蘇時溫度升高的速度。復溫速率不當也會降低凍存細胞存活率。一般來說，復溫速度越快越好。常規的做法是，在370C水浴中，于1-2分鐘內完成復蘇。復溫速度過慢，細胞內往往重新形成較大冰晶而造成細胞損傷。復溫時造成的細胞損傷非?？欤跇O短的時間內發生。

 

　　冷凍保護劑是指可以保護細胞免受冷凍損傷的物質。冷凍保護劑常常配制成一定的溶液。一般來講，只有紅細胞、大多數微生物和極少數有核的哺乳動物細胞懸浮在不加冷凍保護劑的水或簡單的鹽溶液中，并以合適的冷凍速率冷凍，可以獲得活的凍存物。但對于大多數有核哺乳動物細胞來說，在不加冷凍保護劑的情況下，無最適冷凍速率可言，也不能獲得活的冷凍物。例如將小鼠骨髓細胞懸浮在不加冷凍保護劑的平衡鹽溶液中，并以0.3~6000C/min的冷凍速率降溫冷凍，98%以上的細胞會死亡：而加入甘油冷凍保護劑進行冷凍保存時，98%以上的細胞都可存活。

 

　　jurkat細胞冷凍保存方法：

　　按照冷凍保護液在凍結后是否形成冰晶來劃分，凍存方法可分為非玻璃化和玻璃化凍存兩種。非玻璃化凍存是利用各種溫級的冰箱分階段降溫至-700C~-800C，然后直接投入液氮進行保存：或者是利用電子計算機程控降溫儀以及利用液氮的氣、液，按一定的降溫速率從室溫降至-1000C以下，再直接投入液氮保存的方法。以該種方法凍結的細胞懸液或多或少都有冰晶的形成。玻璃化凍存則是指利用多種高濃度的冷凍保護劑聯合形成的玻璃化冷凍保護液保護懸浮細胞，直接投入液氮進行凍存的方法。以該中方法凍結的細胞懸液沒有冰晶的形成。但目前細胞凍存常用的仍是前一種方法。