您的位置: 首頁 > 技術文章 > 玩轉不同類型細胞傳代方法

          玩轉不同類型細胞傳代方法

          更新時間:2022-06-17瀏覽:1857次

          根據不同細胞采取不同的培養細胞傳代方法。懸浮生長的細胞可以用直接吹打或離心分離后傳代,或自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁生長的細胞用直接吹打即可傳代。


          細胞傳代培養時常用的酶為胰蛋白酶,它可以破壞細胞與細胞、細胞與培養瓶之間的細胞連接或接觸,從而使它們之間的連接減弱或*消失。經胰蛋白酶處理后的貼壁細胞在外力(如吹打)的作用下可以分散成單個細胞,再經稀釋和接種后就可以為細胞生長提供足夠的營養和空間,達到細胞傳代培養的目的。

          圖片



          01



          貼壁細胞的消化法傳代

          圖片



           

          吸除或倒掉瓶內舊培養液。



           

          向瓶內加入3-5ml PBS,輕輕搖動培養瓶,使PBS流過所有細胞表面,然后吸掉或倒掉PBS后再加1~2 mL新的消化液進行消化。



           

          最好在37℃或25 ℃以上室溫環境下進行消化。消化2~5 min后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察,發現細胞質回縮、細胞間隙增大后,應立即終止消化。



           

          加*培養基3-5ml,終止消化。



           

          用彎頭吸管,吸取瓶內培養液,反復吹打瓶壁細胞,吹打過程要順序進行,從培養瓶底部一邊開始到另一邊結束,以確保所有底部都被吹到。吹打時動作要輕柔不要用力過猛,同時盡可能不要出現泡沫,這些都會對細胞有損傷。細胞脫離瓶壁后形成細胞懸液。



           

          計數,分別接種在新的培養瓶內。











          02



          懸浮細胞的傳代

          圖片

          圖片

          因懸浮生長細胞不貼壁,故傳代時不必采用酶消化方法,而可直接傳代或離心收集細胞后傳代。直接傳代即讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2~2/3,然后用吸管吹打形成細胞懸液后,再傳代。懸浮細胞常采用離心方法傳代,即將細胞連同培養液一并轉移到離心管內,800~1 000 r/min離心5 min,去除上清,加新的培養液到離心管內,用吸管吹打形成細胞懸液,然后傳代接種。











          03



          半懸浮細胞的傳代

          圖片

          圖片

          半懸浮細胞部分呈現貼壁生長現象,可不經消化處理直接吹打使細胞從瓶壁上脫落下來,而進行傳代。但這種方法僅限于部分貼壁不牢的細胞,如SP2/0細胞等。直接吹打對細胞損傷較大,細胞也常有大量丟失,因而絕大部分貼壁生長的細胞均需消化后,才能吹打傳代。


          推薦產品



          【SNT-002】0.25%胰酶(含EDTA)

          【SNB-001】PBS(Phosphate Buffer Saline) 磷酸鹽緩沖液 1x

          【SNL-120】SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞)


          END




           

          聯系我們
          • QQ:1242926414
          • 郵箱:1242926414@qq.com
          • 傳真:86-027-87800889
          • 地址:武漢東湖新技術開發區高新二路388號武漢光谷國際生物醫藥企業加速器1.2期C22棟二層

          掃一掃,關注公眾號

          ©2025 武漢尚恩生物技術有限公司 版權所有    備案號:鄂ICP備2020018368號-2    技術支持:化工儀器網    Sitemap.xml    總訪問量:180097    管理登陸

          主站蜘蛛池模板: 欧美在线精品永久免费播放| 中文字幕中文字幕| 窝窝午夜看片国产精品人体宴| 国产男女猛烈无遮挡免费视频网站 | 国产亚洲欧美日韩精品一区二区| 91进入蜜桃臀在线播放| 成人国产午夜在线视频| 九九精品视频在线播放8| 热re99久久精品国产66热| 国产xxxxx| 日本成本人视频| 在线观看国产成人AV片| 中文字幕一区二区三区视频在线| 最新亚洲春色av无码专区| 亚洲爆乳无码专区www| 精品人人妻人人澡人人爽牛牛| 国产制服丝袜在线| jizzjizz成熟丰满舒服| 夜夜爽一区二区三区精品| 三级黄色片免费看| 日本精品一区二区在线播放| 亚洲国产精品区| 爱情岛论坛在线视频| 啦啦啦最新在线观看免费高清视频 | 国产成人免费片在线视频观看| 99在线精品免费视频| 欧美综合社区国产| 曰本女同互慰高清在线观看| 亚洲精品国产首次亮相| 综合91在线精品| 国产偷亚洲偷欧美偷精品| 久久国产精品-久久精品| 67194熟妇人妻欧美日韩| 成人三级k8经典网| 久久国产精品免费一区二区三区| 精品96在线观看影院| 日韩a一级欧美一级| 人妻在线日韩免费视频| 老子的大ji巴cao死你| 国产视频一区二区在线播放| 四虎国产精品免费久久影院|