HEL細胞|來源ATCC通過STR鑒定

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----尚恩生物 I8627859203 ----

培養環境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

二、收貨處理方式（T25瓶/凍存管）

【T25】

①快遞保存溫度：室溫

②初步平衡：T25瓶表面消毒后，放37度培養箱平衡復溫2h以上

③處理方式：吸走大部分培養基，留10-12ml培養基，拍照并觀察細胞。密度80%以上即可吸走培養基消化傳代，若密度低于80%可以留10-12 ml繼續培養至細胞密度80%以上

④接種方式：T25傳代第①次建議1:2傳代，即瓶T25傳成兩瓶

⑤注意事項：若細胞出現漂浮，T25瓶不開封，放至37度培養箱過夜，若細胞貼壁即說明活性正常，按正常操作消化傳代即可；若未貼壁，收集細胞培養基離心后，將細胞重懸接種到新的培養瓶中，同時原瓶還貼壁的細胞加培養基繼續培養
發貨T25瓶裝滿大約有75ml培養基，可以收集起來，1500rpm離心5min后，取上清4度保存，用于培養細胞，以平穩過渡到客戶自己的培養基

【凍存管】

①快遞保存溫度：液氮長期保存或-80度3天以內

②初步平衡：無須平衡，直接放入-80冰箱或者液氮罐保存

③處理方式：37度水浴搖晃盡快融化細胞，直接在凍存管內將細胞離心。離心轉速以離心力150g(約900rpm)左右，1min為宜，棄上清，沉淀用新鮮培養基重懸后接種到10cm培養皿，顯微鏡下觀察細胞并拍照，24h后換液一次

④接種方式：一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶

⑤注意事項：收貨時若發現干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存，以上情況及時反饋
干冰發貨的細胞只能在-80保存3天左右，長時間保存會出現活性下降。干冰發貨均為兩支，客戶先復蘇一支，若復蘇失敗及時聯系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態不佳，我方將不提供免費售后服務

特殊情況：

1.若培養瓶或者凍存管出現破碎或漏液情況，及時拍照聯系銷售反饋，按指導進行進一步處理。若只是外包裝破損一般不影響培養瓶和凍存管，請放心使用。

2.若無法觀察到細胞，建議收集細胞培養基，1200rpm離心5min，觀察細胞沉淀量，并用少量培養基重懸沉淀后，取部分懸液放到計數板或者載玻片上觀察細胞。

3.部分細胞增殖較快，發貨細胞量較多時，培養基可能出現顏色變黃現象。繼續培養使用此類培養基時，需要及時觀察培養基顏色變化，縮短培養基換液周期，并每瓶多加2-3ml培養基。

4.收貨當天不處理細胞時，T25瓶可以消毒拆封口膜后不擰開瓶蓋放37度培養箱靜置過夜，但不建議超過24h；凍存管可以直接放液氮長期保存或-80度3天以內，必須一周內復蘇一只培養檢查，否則將超過一周售后期。