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          小鼠胚胎成纖維細胞

          簡要描述:尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業化的原代細胞分離培養經驗,能夠為您提供高品質的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結豐富經驗的人才,并配備了整套實驗設備,全程自主研發,嚴控開發流程,保障產品質量,緊抓售后服務,可以提供高質量的小鼠胚胎成纖維細胞。已與國內外多家科研單位、藥企、以及醫院等建立了良好的合作關系,成為生物醫藥行業的誠信伙伴和堅強后盾。

          • 產品型號:SNP-M075
          • 廠商性質:生產廠家
          • 更新時間:2025-03-12
          • 訪  問  量:706
          詳細介紹
          品牌其他品牌貨號SNP-M075
          規格T25瓶供貨周期現貨
          主要用途實驗應用領域生物產業

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          一、細胞基本屬性

          貨號:SNP-M075

          產品名稱:小鼠胚胎成纖維細胞

          物種:小鼠

          組織來源:胚胎組織

          細胞簡介:該細胞分離自胚胎;成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養常用的飼養層細胞,能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子,故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,且分泌效果優于外源添加的一些因子,而且可以為ES細胞的培養提供類似于體內的微環境,故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

          方法簡介:采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

          配套體系:成纖維體系

          發貨形式:T25瓶(1×106左右)

          規格:5×10^5cells/T25瓶

          培養條件:具體培養條件詳詢尚恩生物細胞培養技術專員

          培養環境:37℃,5%二氧化碳

          我們推薦使用尚恩生物小鼠胚胎成纖維細胞專用*培養基(產品貨號:SNPM-M075)作為體外培養的培養基。


          二、細胞培養操作

          換液周期2-3天
          培養基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
          傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
          傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養基
          2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
          3.T25瓶加1ml左右,輕輕晃動培養瓶以使鋪勻瓶底細胞層;
          4.將培養瓶放入37度培養箱消化;
          5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養基終止消化;
          6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
          7.加新的*培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
          8.補足*培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養;
          注意事項不同品牌消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

          消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。


          三、細胞凍存操作
          凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
          凍存規格200-300萬/ml,1ml每管
          凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
          2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
          3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存

          注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


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